甘草素调控miR-155对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响

更新时间:2023-05-28

【摘要】目的研究甘草素对脂多糖（LPS）诱导的骨关节炎（OA）软骨细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法将软骨细胞分为6组:正常组（正常培养的软骨细胞）,模型组(100 ng·mL-1 LPS处理软骨细胞6 h)和第一实验组至第四实验组(分别用12.5,25.0,50.0,100.0μmol·L-1甘草素培养细胞12 h,再用100 ng·mL-1 LPS处理软骨细胞6 h)。在软骨细胞中,转染anti-miR-con+100 ng·mL-1 LPS（第一转染组）、转染anti-miR-155+100 ng·mL-1 LPS（第二转染组）、转染miR-con+100 ng·mL-1LPS+50μmol·L-1 甘草素（第三转染组）和转染miR-155+100 ng·mL-1LPS+50μmol·L-1甘草素（第四转染组）。噻唑蓝比色法和流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡,以实时荧光定量-PCR和蛋白质印迹法检测相关基因、蛋白表达水平。结果正常组、模型组和第一实验组至第四实验组的细胞存活率分别为（100.00±10.24）%,（52.36±5.23）%,（63.15±6.31）%,（78.29±7.83）%,（92.89±9.30）%和（96.13±9.61）%。模型组与正常组相比、或者第一实验组至第四实验组与模型组相比,差异均有统计学意义（均P<0.05）。正常组、模型组、第三实验组的细胞凋亡率分别为（8.13±0.81）%,（33.22±3.32）%和（13.54±1.35）%。模型组与正常组相比、或者第三实验组与模型组相比,差异均有统计学意义（均P<0.05）。转染后,正常组、模型组、第一转染组和第二转染组的细胞存活率分别为（100.00±10.25）%,（53.13±5.31）%,（52.46±5.25）%和（89.06±9.01）%;这4组细胞凋亡率分别为（8.33±0.83）%,（32.42±3.25）%,（33.46±0.33）%和（15.86±1.59）%。模型组与正常组相比、或者第二转染组与第一转染组相比,差异均有统计学意义（均P<0.05）。模型组、第三实验组、第三转染组和第四转染组的细胞存活率分别为（100.02±10.43）%,（146.15±14.22）%,（149.46±15.05）%和（112.88±11.30）%;这4组的细胞凋亡率分别为（32.42±3.25）%,（14.08±1.40）%,（14.36±1.44）%和（28.69±2.87）%,第三实验组与模型组相比、或者第四转染组与第三转染组相比,差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论甘草素可以保护LPS诱导的软骨细胞增殖,并抑制其凋亡,这可能通过下调miR-155表达和调控Wnt/β-catenin信号通路发挥作用。

【关键词】 甘草素 微小RNA-155 骨关节炎 软骨细胞 增殖 凋亡

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